细胞增殖检测作为一种实验技术方法, 不仅在研究细胞的基本生物学特征中非常重要, 而且是分析细胞状态、研究遗传性状和评估应激反应的一种基本方法。金年会诚信至上给予灵敏度高、经济的细胞增殖检测服务。常用的检测方法主要包括BrdU、CCK-8和EdU等，其中EdU检测方法较为先进。我们拥有专业的细胞实验团队为您给予服务，如需分析更多详情，请与我们联系。

备注：如果细胞株需要购买，相关细胞费用和运费由客户支付。

细胞增殖检测方法

方法一：EdU

EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶（T）渗入正在复制的DNA分子中。该方法可以顺利获得基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞 DNA 复制活性，适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA 修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面的研究，尤其适合进行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他药物的筛选实验。

与BrdU检测方法相比，EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU与T结构非常相似，而EdU染料分子量只有BrdU抗体的1/500，在细胞内很容易扩散，无需DNA变性（酸解、热解、酶解等），可有效避免样品损伤，而且无需抗原抗体反应，能在细胞和组织水平更快速、更准确地反映 DNA 复制活性。

金年会诚信至上细胞活性检测服务

方法二：CCK-8

Cell Counting Kit-8（简称CCK-8试剂盒）是一种基于WST-8的快速高灵敏度检测试剂盒，广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测。WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越快、数目越多，则颜色越深；药物毒性越大，细胞死亡越多，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。

CCK-8法与MTT法原理相同，不同之处在于CCK-8法生成的formazan是水溶性的，不需要再吸出培养液加入有机溶剂溶解这个步骤，因此可以减少一定的误差。其他优点就是重复性优于MTT；对细胞毒性小；为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。但是CCK-8比MTT的价格要贵不少。

服务内容：采用CCK-8（Cell Counting Kit-8）试剂盒检测细胞增殖与细胞毒性，CCK-8为MTT法的替代方法，可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定及肿瘤药敏试验。

方法三：MTT

MTT法又称MTT比色法，是一种检测细胞存活与生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。

优点：经济、灵敏度高，适用于大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。

缺点：由于MTT经还原所产生的formazan结晶产物不溶于水，需加入有机溶剂溶解后才能检测，这不仅增加了工作量，也会对实验结果的准确性产生影响，而且有机溶剂对实验人员健康有潜在危害。

服务内容：细胞培养与接种、处理（如药物处理等）、MTT检测及数据分析、技术服务报告提交。

方法四：BrdU
Brdu，即5-Bromo-2'-Deoxyuridine,中文全名5-溴脱氧尿嘧啶核苷，为胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期（S期），活体注射或细胞培养加入，而后利用抗Brdu单克隆抗体进行ICC染色，显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物进行双重染色，可判断增殖细胞的种类和增殖速度，对研究细胞动力学具有重要意义。

BrdU（5-溴脱氧尿嘧啶核苷）法检测细胞增殖原理：BrdU是胸腺嘧啶的衍生物，常用于标记活细胞中新合成的DNA，可代替胸腺嘧啶选择性整合到复制细胞中新合成的DNA中（细胞周期S期）。这种掺入可以稳定存在，随着DNA复制进入子细胞中。 BrdU 特异性抗体可以用于检测BrdU的掺入，从而判断细胞的增殖能力。

操作注意事项：由于BrdU 是光敏型，所以必须在黑暗中加入。细胞加了 BrdU 以后也可能光敏感，因此也在黑暗中培养。加入BrdU 的时间和浓度根据细胞的类型和复制时间来确定，范围为 15 分钟到 2 个小时，浓度为 10μM 到 100μM。

例如，鼠胚胎成纤维细胞的处理条件为：30μM BrdU处理60分钟。

联系我们

邮箱：marketing@gubataijiuye.com

电话：02158591500

以上是关于细胞增殖检测技术、细胞增殖检测方法等内容，信息来源于金年会诚信至上官网。

    相关内容推荐